Слайд 2
![БАКТЕРИОФАГИ «пожирающий бактерии» (от бактерия + греч. phagos – пожирающий)](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-1.jpg)
БАКТЕРИОФАГИ
«пожирающий бактерии» (от бактерия + греч. phagos – пожирающий)
вирусы бактерий, специфически
проникающие в бактериальные клетки и поражающие их.
Для обозначения используют:
название м/о, из которых они выделены: колифаги, стафилофаги,
буквы латинского алфавита
Слайд 3
![БАКТЕРИОФАГ Определение: - вирус, поражающий прокариотическую клетку, Структура: НК (ДНК или РНК)+ белок](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-2.jpg)
БАКТЕРИОФАГ
Определение: - вирус, поражающий прокариотическую клетку,
Структура: НК (ДНК или РНК)+ белок
Слайд 4
![](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-3.jpg)
Слайд 5
![Строение бактериофагов икосаэдрическая головка, хвостовой отросток: внутри – полый цилиндрический](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-4.jpg)
Строение бактериофагов
икосаэдрическая головка,
хвостовой отросток: внутри – полый цилиндрический стержень, сообщающийся с
головкой, а снаружи - чехол отростка, заканчивающийся шестиугольной базальной пластинкой с шипами, от которых отходят фибриллы (нити),
капсид головки и чехол хвостового отростка бактериофага состоят из полипептидных субъединиц, уложенных по икосаэдрическому (головка) или спиральному (отросток) типу симметрии.
Слайд 6
![Строение классического бактериофага](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-5.jpg)
Строение классического бактериофага
Слайд 7
![](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-6.jpg)
Слайд 8
![Нуклеиновая кислота фага Бактериофаги (фаги) содержат ДНК или РНК: -](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-7.jpg)
Нуклеиновая кислота фага
Бактериофаги (фаги) содержат ДНК или РНК:
- двунитевые
- однонитевые
линейные,
-кольцевые.
Большинство
– двунитевую ДНК, замкнутую в кольцо
Слайд 9
![В состав головки входит: полипептид, состоящий из аспарагиновой, глутаминовой кислот](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-8.jpg)
В состав головки входит:
полипептид, состоящий из аспарагиновой, глутаминовой кислот и лизина,
-
у некоторых – гистоноподобный белок → суперспирализация ДНК.
Слайд 10
![В состав сокращающегося чехла входит: у некоторых фагов входит АТФ](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-9.jpg)
В состав сокращающегося чехла входит:
у некоторых фагов входит АТФ и
ионы кальция.
В дистальной части отростка – лизоцим.
Слайд 11
![Морфологические типы бактериофагов I тип (нитчатые) без головки (только отросток)](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-10.jpg)
Морфологические типы бактериофагов
I тип (нитчатые)
без головки (только отросток)
II тип
без отростка (только
головка)
III тип
головка и отросток, короткий без чехла
IV тип
головка и отросток, длинный с чехлом, не сокращающийся
V тип
головка и отросток, длинный с чехлом, сокращающийся
Слайд 12
![](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-11.jpg)
Слайд 13
![Классификация бактериофагов по спектру действия полифаги поражают несколько видов монофаги](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-12.jpg)
Классификация бактериофагов по спектру действия
полифаги
поражают несколько видов
монофаги (видовые)
поражают один вид
типовые фаги
поражают
часть вида (фаговар)
Слайд 14
![Классификация фагов в зависимости от эффекта действия на бактериальную клетку Вирулентные умеренные](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-13.jpg)
Классификация фагов в зависимости от эффекта действия на бактериальную клетку
Вирулентные
умеренные
Слайд 15
![Взаимодействие вирулентного фага с бактериальной клеткой адсорбция фага на специальных](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-14.jpg)
Взаимодействие вирулентного фага с бактериальной клеткой
адсорбция фага на специальных рецепторах КС
(на протопластах не происходит)
проникновение НК
(депротеинизация)
репликация фаговой НК и синтез фаговых белков
сборка фаговых частиц
выход зрелых фагов
лизис бактерии бактерия не погибает
(«взрыв») (некоторые нитчатые фаги)
ПРОДУКТИВНАЯ ИНФЕКЦИЯ
Слайд 16
![Взаимодействие умеренного фага с бактериальной клеткой адсорбция фага на специальных](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-15.jpg)
Взаимодействие умеренного фага с бактериальной клеткой
адсорбция фага на специальных рецепторах КС
(на протопластах не происходит)
проникновение НК
(депротеинизация)
интеграция фаговой НК в геном бактерии
профаг
(фаговый репрессор блокирует транскрипцию)
лизогенная культура
Л И З О Г Е Н И З А Ц И Я
в дальнейшем – может индукция профага
продуктивная инфекция
Слайд 17
![Практическое применение бактериофагов Фагодиагностика Выявление определённого вида бактерий в патологическом](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-16.jpg)
Практическое применение бактериофагов
Фагодиагностика
Выявление определённого вида бактерий в патологическом материале
реакция нарастания титра
фага
Идентификация чистой культуры
определение вида
фагоиндикация
определение фаговара
фаготипирование
Слайд 18
![Практическое применение бактериофагов ● Фаготерапия Фаг применяется местно ●Фагопрофилактика брюшной тиф дизентерия](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-17.jpg)
Практическое применение бактериофагов
● Фаготерапия
Фаг применяется местно
●Фагопрофилактика
брюшной тиф
дизентерия
Слайд 19
![Выделение бактериофага Материал: объект внешней среды бактериальная культура ⇩ бактериальный](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-18.jpg)
Выделение бактериофага
Материал:
объект внешней среды
бактериальная культура
⇩
бактериальный фильтр
⇩
фильтрат
⇩
МПБ + чувствительная бактерия
⇩
инкубация
⇩
роста нет –
фаг присутствует (очищают фильтрованием)
рост есть – фаг отсутствует
Слайд 20
![Определение активности бактериофагов = фагоиндикация Качественный метод: метод «стерильной дорожки»](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-19.jpg)
Определение активности бактериофагов = фагоиндикация
Качественный метод:
метод «стерильной дорожки»
Количественные методы:
А) Метод Грациа
Б) Метод Аппельмана
Слайд 21
![Метод фагоиндикации «стекающая капля» = «стерильная дорожка» стекающая капля по](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-20.jpg)
Метод фагоиндикации «стекающая капля» = «стерильная дорожка»
стекающая капля по газону засеянной
культуры
⇩
регистрация роста бактерий в месте стекания капли
⇩
рост есть – -
роста нет – +
Слайд 22
![Определение активности бактериофагов = фагоиндикация Количественные методы: А) Метод Грациа:](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-21.jpg)
Определение активности бактериофагов = фагоиндикация
Количественные методы:
А) Метод Грациа: готовят десятикратные разведения
фага в хлориде натрия от 10-2 до 10-7
Затем по 0,5 мл из каждого разведения смешивают с таким же объемом бульонной культуры и 4 мл расплавленного и остуженного до 45 град. агара и выливают на чашки Петри.
Когда агар застынет чашки помещают в термостат при 37 градусах на 24 часа и затем учитывают результаты:
-одна фаговая частица образует одно «стерильное пятно»
- Величина, показывающая концентрацию фага называется титром.
Слайд 23
![Титрование фага по Грациа МПА + разведение фагосодержащего материала +](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-22.jpg)
Титрование фага по Грациа
МПА + разведение фагосодержащего материала + чувствительная культура
МПА
(подложка)
чашка Петри со средой (в разрезе)
Слайд 24
![](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-23.jpg)
Слайд 25
![Определение активности бактериофагов = фагоиндикация Количественные методы: Б) Метод Аппельмана:](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-24.jpg)
Определение активности бактериофагов = фагоиндикация
Количественные методы:
Б) Метод Аппельмана: готовят десятикратные разведения
фага в питательном бульоне от 10-2 до 10-8.
Затем в каждую пробирку добавляют по 0,2мл бульонной культуры и ряды ставят в термостат.
После инкубации в термостате учитывают результаты:
=в положительном случае наблюдается просветление среды.
Разведение в последней пробирке, где произошел полный лизис культуры, называется титром.
Слайд 26
![Титрование фага по Аппельману](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-25.jpg)
Титрование фага по Аппельману
Слайд 27
![Фаготипирование бактерий засев газоном на пластинчатый агар изучаемого штамма нанесение](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-26.jpg)
Фаготипирование бактерий
засев газоном на пластинчатый агар изучаемого штамма
нанесение капель типовых фагов
инкубация
регистрация
«стерильных пятен» («бляшек»)
фаготип (фаговар) = перечень типовых фагов, лизирующих данный вариант
Слайд 28
![Определение спектра литического действия фага Чашку делят на квадратики и](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/329487/slide-27.jpg)
Определение спектра литического действия фага
Чашку делят на квадратики и на каждый
газоном засевают испытуемые штаммы,
затем на каждый квадратик петлей или пипеткой наносят каплю фага
после инкубации в термостате в течение 24 час определяют наличие «стерильных пятен».
Количество культур, которые лизирует бактериофаг – спектр его действия.