Методы оценки белковой экспрессии. ИФАанализ, Вестерн блоттинг, иммуноприципитация, иммуногистохимия презентация
Содержание
- 2. Актуальность. Целью многих генно-инженерных исследований является создание рекомбинантных молекул ДНК, содержащих гены, которые должны экспрессироваться в
- 3. ИФА – иммунохимический метод анализа, заключающийся в выявлении антигенов (Аг) с помощью специфичных к ним антител
- 4. ИФА гомогенный неконкурентный конкурентный Гетерогенный (твердофазный)
- 5. Конкурентный ИФА Прямой конкурентный - используются иммобилизованые на твердой фазе специфические антитела, а меченый ферментом и
- 6. «Сэндвич»-метод может быть использован для анализа только тех антигенов, на поверхности которых существуют, по крайней мере,
- 7. Ферменты для ИФА Пероксидаза хрена Щелочная фосфатаза Тетраметилбензидин Диаминобензидин ИФА - метод количественный, им можно определить
- 8. Представление результатов ИФА Таблицы Графики (вертикальные, горизонтальные,круговые диаграммы Диаграммы рассеяния – данные корреляционного анализа
- 9. Спектр биологических жидкостей для ИФА – сыворотка/ плазма крови, слюна, спинномозговая жидкость, экссудаты, супернатанты тканей. Основное
- 10. Вестерн Блоттинг WB – аналитический метод, используемый для определения специфичных белков в образце. На первом этапе
- 11. Первый этап – пробоподготовка и электрофорез При использовании 1D-электрофореза белков в полиакриламидном геле по Лемли обычно
- 12. Третий этап – блокирование неспецифического связывания на PVDF-мембране Достигается помещением мембраны в разбавленный раствор нежирного сухого
- 13. Пероксидаза хрена катализирует окисление люминола в 3-аминофталат через серию интермедиатов. Данная реакция сопровождается свечением низкой интенсивности
- 14. WB – метод полуколичественный ! Проводится перерасчет на актин (структурный белок, до 20% от всех белков
- 15. Форма представления результатов исследования WB
- 16. Сопоставление клинических параметров в зависимости от выраженности асцита Feigenberg T., Clarke B., Virtanen C. et. al.,
- 17. Экспрессия 20S протеасом у больных раком яичников 20S CD9 20S CD9 ПОЯ плазма асцит Рак яичников
- 18. Экспрессия 20S протеасом у больных колоректальным раком 20S 20S CD9 CD9 контроль КРР Л М П-Д
- 19. Оборудование для WB Система визуализации WorkFlow Сочетает в себе принципы хемилюминесцентной и флюоресцентной детекции белка при
- 20. iBind™ Western Device The membrane was blocked with 1X iBind Solution (Invitrogen, USA). Primary antibody to
- 21. ИММУНОПРЕЦИПИТАЦИЯ Иммунопреципитация – метод выделения белка из сложных смесей, таких как клеточные лизаты, сыворотки, тканевые гомогенаты
- 22. ПРИМЕНЕНИЕ ИММУНОПРЕЦИПИТАЦИИ Выделение белковых комплексов WB, ELISA на супернатантах тканей - качественное и количественное идентификация белков
- 23. ЗНАЧЕНИЕ БЕЛКОВ В СОСТАВЕ ПРОТЕИНОВЫХ КОМПЛЕКСОВ Индукция клеточной пролиферации и подвижности (во всех клетках) IGF-IR в
- 24. Иммуногистохимия – выявление тканевых антигенов с помощью специфичных антител, при этом один из участников иммунологической реакции
- 25. ИГХ метод в практической онкологии. В клиническом аспекте метод ИГХ анализа на совре- менном этапе позволяет:
- 27. Скачать презентацию