Свойства простых и сложных белков презентация

Поглощение света в видимом и ультрафиолетовом диапазонах обусловлено электронными переходами в молекулах поглощающего вещества. Поглощение света в инфракрасном диапазоне имеет иную природу. Оно связано с переходами между колебательными уровнями основного состояния молекулы. Полосы поглощения, отвечающие колебательным переходам, обычно лежат в диапазоне длин волн от 2000 до 50000 нм или, как принято записывать для ИК-спектров, в диапазоне волновых чисел от 5000 до 200 см-1.

ИК – спектр белков
Для ИК-спектров белков и продуктов их распада — пептидов — характерно наличие двух основных полос поглощения — амида I (1650 см-1) и амида II (1550 см-1), обусловленных валентными колебаниями С=О-связи (амид I) и плоскостными деформационными колебаниями NH-связи (амид II). Таким образом, если в спектрах исследуемого вещества прослеживаются обе полосы, то с большой вероятностью можно утверждать, что в анализируемой пробе есть полипептид или белок. Это означает, что в качестве связующего могли быть использованы яичный желток или белок, казеин или желатина. Дополнительным свидетельством присутствия желатины может служить наличие в ИК-спектре полосы поглощения при 3330 см-1 (амид А), характерной для коллагена или желатины.

УФ – спектр белков
Растворы белков имеют характерный спектр поглощения электромагнитного излучения в ультрафиолетовой области.
Получаемые УФ-спектры белковых растворов имеют максимумы поглощения при длине волны 190 нм и 280 нм. Поглощение при 190 нм обусловлено пептидными группами белка, а поглощение при 280 нм — его ароматическими группами.
По оптической плотности, измеренной при определенной длине волны, можно установить количество белка в растворе: чем она выше, тем выше концентрация белка. Однако этот метод имеет ограничения: во-первых, необходим раствор белка и, во-вторых, этот раствор должен быть не опалесцирующим, т.е. абсолютно прозрачным.

УФ-спектр белков

Как рассмотрено выше, ультрафиолетовое излучение поглощается главным образом аминокислотами триптофаном, тирозином и фенилаланином. Эти аминокислоты высоко чувствительны к повреждающему действию ультрафиолета. Но наибольшей фоточувствительностью к коротковолновому ультрафиолетовому излучению в белках отличаются дисульфидные мостики, разрываемые при поглощении фотона. Это подтверждают данные Табл. 3 о молярных коэффициентах поглощения , квантовых выходах и поперечных сечениях фотоинактивации основных хромофорных групп в белках для УФС излучения с длиной волны 254 нм. Они демонстрируют в 3 раза большую чувствительность (-S-S-) сшивок по сравнению с триптофаном. Фотодеструкция фенилаланина, тирозина, а также пептидных связей намного менее существенна.
При облучении УФВ светом с длиной волны более 280 нм фотоповреждение белков в большей мере обусловлено поглощением триптофана и тирозина.
Процессы ультрафиолетовой инактивации белков, конечно, сложнее, чем фотопревращения отдельных аминокислот.

Спектр инактивации белков

УФ-инактивация белков