Слайд 2
![ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-1.jpg)
Слайд 3
![Питательные среды являются основой микробиологической работы, и их качество нередко определяет результаты всего исследования.](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-2.jpg)
Питательные среды являются основой микробиологической работы, и их качество нередко определяет
результаты всего исследования.
Слайд 4
![](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-3.jpg)
Слайд 5
![Питательные среды предназначены для накопления, выделения, изучения и сохранения микроорганизмов.](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-4.jpg)
Питательные среды предназначены для накопления, выделения, изучения и сохранения микроорганизмов.
По
своей сущности питательные среды являются искусственной средой обитания микробов
Слайд 6
![Требования к питательным средам: 1) быть питательными, т. е. содержать](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-5.jpg)
Требования к питательным средам:
1) быть питательными, т. е. содержать в легко
усвояемом виде все вещества, необходимые для удовлетворения пищевых и энергетических потребностей микроорганизмов;
2) иметь оптимальную концентрацию водородных ионов — рН, так как только при оптимальной реакции среды, влияющей на проницаемость оболочки, микроорганизмы могут усваивать питательные вещества. Для большинства патогенных бактерий оптимальна слабощелочная среда (рН 7,2—7,4);
Слайд 7
![Требования к питательным средам: 3) быть изотоничными для микробной клетки;](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-6.jpg)
Требования к питательным средам:
3) быть изотоничными для микробной клетки; т.
е. осмотическое давление в среде должно быть таким же, как внутри клетки. Для большинства микроорганизмов оптимальна среда, соответствующая 0,5% раствору натрия хлорида; 4) быть стерильными, так как посторонние микробы препятствуют росту изучаемого микроба, определению его свойств и изменяют свойства среды (состав, рН и др.);
Слайд 8
![Требования к питательным средам 5) плотные среды должны быть влажными](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-7.jpg)
Требования к питательным средам
5) плотные среды должны быть влажными и
иметь оптимальную для микроорганизмов консистенцию; 6) обладать определенным окислительно-восстановительным потенциалом; 7) быть по возможности унифицированным, т. е. содержать постоянные количества отдельных ингредиентов; Желательно, чтобы среды были прозрачными — удобнее следить за ростом культур, легче заметить загрязнение среды посторонними микроорганизмами.
Слайд 9
![Классификация сред В основу классификации которых положены следующие признаки. 1.](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-8.jpg)
Классификация сред
В основу классификации которых положены следующие признаки. 1. Исходные компоненты.
По исходным компонентам различают натуральные и синтетические среды. 2. Консистенция (степень плотности). Среды бывают жидкие, плотные и полужидкие
Слайд 10
![по консистенции Бульонные Полужидкие Плотные](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-9.jpg)
по консистенции
Бульонные Полужидкие Плотные
Слайд 11
![Классификация сред 3. Состав. Среды делят на простые и сложные.](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-10.jpg)
Классификация сред
3. Состав. Среды делят на простые и сложные. К
простым относят мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА), бульон и агар Хоттингера, питательный желатин и пептонную воду. Сложные среды готовят, прибавляя к простым средам кровь, сыворотку, углеводы и другие вещества, необходимые для размножения того или иного микроорганизма.
Слайд 12
![Классификация сред 4.Назначение: а) основные (общеупотребительные) среды служат для культивирования](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-11.jpg)
Классификация сред
4.Назначение:
а) основные (общеупотребительные) среды служат для культивирования
большинства патогенных микробов (МПА, МПБ, бульон и агар Хоттингера, пептонная вода; )
б) специальные среды служат для выделения и выращивания микроорганизмов, не растущих на простых средах.
Слайд 13
![в) элективные (избирательные) среды служат для выделения определенного вида микробов.](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-12.jpg)
в) элективные (избирательные) среды служат для выделения определенного вида микробов. Жидкие
элективные среды называют средами накопления.
Селенитовый бульон
Слайд 14
![Классификация питательных сред по назначению](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-13.jpg)
Классификация питательных сред по назначению
Слайд 15
![Висмут-сульфитный агар: элективная (избирательная) среда](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-14.jpg)
Висмут-сульфитный агар: элективная (избирательная) среда
Слайд 16
![Элективная (избирательная) среда Эндо для кишечной палочки](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-15.jpg)
Элективная (избирательная) среда Эндо для кишечной палочки
Слайд 17
![Классификация сред г) дифференциально-диагностические среды позволяют отличить (дифферен-цировать) один вид микробов от другого по ферментативной активности.](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-16.jpg)
Классификация сред
г) дифференциально-диагностические среды позволяют отличить (дифферен-цировать) один вид микробов
от другого по ферментативной активности.
Слайд 18
![Определение сахаролитических свойств микробов Среды Гисса](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-17.jpg)
Определение сахаролитических свойств микробов
Среды Гисса
Слайд 19
![Среда Олькеницкого для дифференциации энтеробактерий по способности сбраживать углеводы](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-18.jpg)
Среда Олькеницкого для дифференциации энтеробактерий по способности сбраживать углеводы
Слайд 20
![Определение протеолитических свойств микробов Способность МКО расщеплять белки – изучают](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-19.jpg)
Определение протеолитических свойств микробов
Способность МКО расщеплять белки – изучают на средах
с желатином (разжижение среды), молоком, сывороткой, пептоном. В процессе ферментации образуются индол, сероводород, аммиак.
Слайд 21
![Сухая питательная среда для определения протеолитических свойств бактерий](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-20.jpg)
Сухая питательная среда для определения протеолитических свойств бактерий
Слайд 22
![Сухая питательная среда типа SIM предназначена для идентификации энтеробактерий по способности образования индола и сероводорода](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-21.jpg)
Сухая питательная среда типа SIM предназначена для идентификации энтеробактерий по способности
образования индола и сероводорода
Слайд 23
![д) консервирующие среды предназначены для первичного посева и транспортировки исследуемого](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-22.jpg)
д) консервирующие среды предназначены для первичного посева и транспортировки исследуемого материала;
в них предотвращается отмирание патогенных микроорганизмов и подавляется развитие сапрофитов
Слайд 24
![Транспортные среды Транспортная среда для холерного вибриона – 1% пептонная вода с теллуритом калия](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-23.jpg)
Транспортные среды
Транспортная среда для холерного вибриона
– 1% пептонная вода с
теллуритом калия
Слайд 25
![Этапы приготовления сред: Этапы приготовления сред: 1) варка. Варят среды](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-24.jpg)
Этапы приготовления сред:
Этапы приготовления сред: 1) варка. Варят среды на открытом
огне, водяной бане, в автоклаве или варочных котлах, подогреваемых паром.
2) установление оптимальной величины рН.
с помощью индикаторных бумажек
потенциометром или .компаратором (аппарат Михаэлиса).
При стерилизации рН сред снижается на 0,2, поэтому сначала устанавливают рН на 0,2 больше.
Слайд 26
![Индикаторные бумаги для определения рН](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-25.jpg)
Индикаторные бумаги для определения рН
Слайд 27
![Ориентировочное определения рН с помощью индикаторных бумаг Бумаги смочены слева](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-26.jpg)
Ориентировочное определения рН с помощью индикаторных бумаг
Бумаги смочены слева направо:
20% раствором соляной кислоты, буферным раствором с рН 4,01, буферным раствором с рН 9,18, 20% раствором гидроокиси натрия
Слайд 28
![рН-метр с комбинированным электродом](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-27.jpg)
рН-метр с комбинированным электродом
Слайд 29
![Стандарт – титры для приготовления образцовых буферных растворов](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-28.jpg)
Стандарт – титры для приготовления образцовых буферных растворов
Слайд 30
![Этапы приготовления сред: 3) осветление. Осветление сред производят, если при](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-29.jpg)
Этапы приготовления сред:
3) осветление. Осветление сред производят, если при варке
они мутнеют или темнеют. Для осветления в среду, подогретую до 50°С, вливают белок куриного яйца, взбитый с двойным количеством воды, перемешивают и кипятят. Свертываясь, белок увлекает в осадок взвешенные в среде частицы. Таким же способом можно вместо яичного белка использовать сыворотку крови (20—30 мл на 1л среды).
Слайд 31
![Этапы приготовления сред: 4) фильтрация. Фильтрацию жидких и расплавленных желатиновых](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-30.jpg)
Этапы приготовления сред:
4) фильтрация. Фильтрацию жидких и расплавленных желатиновых сред
производят через фильтры из фильтровальной бумаги. Фильтрацию агаровых сред проводят через ватно-марлевый фильтр. Фильтрацию агаровых сред можно заменить отстаиванием
Слайд 32
![Этапы приготовления сред: 5) разлив. Разливают среды в чистую, сухую](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-31.jpg)
Этапы приготовления сред:
5) разлив. Разливают среды в чистую, сухую посуду.
В пробирки по 5-10 мл, флаконы, колбы, матрацы и бутылки не более чем на 2/з емкости, в чашки Петри по 15-20мл (высота слоя 0,25-0,3см). Для разлива пользуются воронкой или бюреткой. При разливке во флаконы можно пользоваться мерными цилиндрами или стаканами.
Слайд 33
![](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-32.jpg)
Слайд 34
![Этапы приготовления сред: 6) стерилизация (в автоклаве). Среды, которые стерилизуют](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-33.jpg)
Этапы приготовления сред:
6) стерилизация (в автоклаве). Среды, которые стерилизуют при
температуре выше 100°С, разливают в чистую сухую посуду. Среды, стерилизуемые при более низкой температуре, обязательно разливают в стерильную посуду. Посуду со средой обычно закрывают ватно-марлевыми пробками, поверх которых надевают бумажные колпачки. 7) контроль
Слайд 35
![Стерилизация в автоклаве](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-34.jpg)
Слайд 36
![Контроль сред: контроль стерильности химический контроль биологический контроль](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-35.jpg)
Контроль сред:
контроль стерильности
химический контроль
биологический контроль
Слайд 37
![для контроля стерильности среды ставят в термостат на 2 суток,](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-36.jpg)
для контроля стерильности среды ставят в термостат на 2 суток, после
чего просматривают. Если на средах не появятся признаки роста, их считают стерильными и передают для химического контроля по нескольку образцов каждой серии;
Слайд 38
![б) химический контроль: окончательно устанавливают рН, содержание общего и аминного](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-37.jpg)
б) химический контроль: окончательно устанавливают рН, содержание общего и аминного азота,
пептона. Химический контроль сред производят в химической лаборатории;
Слайд 39
![в) для биологического контроля несколько образцов среды засевают специально подобранными](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-38.jpg)
в) для биологического контроля несколько образцов среды засевают специально подобранными культурами
микроорганизмов, и по их росту судят о питательных (ростовых) свойствах среды
Слайд 40
![Биологические показатели - чувствительность; - дифференцирующие свойства; - ингибирующие свойства](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-39.jpg)
Биологические показатели
- чувствительность;
- дифференцирующие свойства;
- ингибирующие свойства (показатель ингибиции)
;
-эффективность (для бульонных сред) ;
- прорастания; (для агаровых сред) ;
- стабильность основных биологических свойств микроорганизмов;
- некоторые другие для специализированных сред (нейтрализующие свойства, чувствительность микроорганизмов к антимикробным препаратам, жизнеспособность и сохранение основных биологических свойств микроорганизмов в транспортных средах).
Слайд 41
![НЕКОТОРЫЕ ПРИЧИНЫ ОТСУТСТВИЯ РОСТА МИКРООРГАНИЗМОВ НА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ повышенное содержание](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-40.jpg)
НЕКОТОРЫЕ ПРИЧИНЫ ОТСУТСТВИЯ РОСТА МИКРООРГАНИЗМОВ НА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ
повышенное содержание жирных кислот
присутствующих почти во всех материалах, используемых в микробиологии – в пептоне, агаре, казеине, вате и т.д. Для удаления жирных кислот в среду добавляют, какое либо вещество, связывающее жирные кислоты – 0,5% активированного угля или 0,15% растворимого крахмала, или 10% (объемных) сыворотки;
присутствие перекисей, в зависимости, от концентрации которых в одних случаях может наблюдаться ингибирование только штаммов, не содержащих каталазу, тогда как в других не растут даже штаммы, продуцирующие ее. Ингибиторное действие можно частично снять добавив к питательной среде восстановители, сыворотку крови, активированный уголь;
появление ингибиторных субстанций, образующихся в результате нагревания глюкозы при щелочной реакции среды в присутствии фосфатов или переход азотсодержащих соединений питательной среды в неусвояемую форму;
несоответствие окислительно-восстановительного потенциала среды.
Слайд 42
![Физико-химические показатели внешний вид, растворимость (для сухих препаратов), прозрачность и](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/53423/slide-41.jpg)
Физико-химические показатели
внешний вид,
растворимость (для сухих препаратов),
прозрачность и цветность,
рН,
содержание аминного азота,
содержание хлоридов,
потеря в массе при высушивании (для сухих препаратов),
сухой остаток (для сред готовых к применению),
прочность студня, температура плавления, температура застудневания, продолжительность плавления студня среды (для агаровых сред).