Жидкостная хроматография презентация

ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
МЕТОД РАЗДЕЛЕНИЯ И АНАЛИЗА ВЕЩЕСТВ,
ГДЕ П.Ф. СЛУЖИТ ЖИДКОСТЬ
Методы жидкостной хроматографии
ЖИДКОСТНО–ТВЕРДОФАЗНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ (адсорбционная)
(ионообменная)
ЖИДКОСТНО-ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ (распределительная)
ЖИДКОСТНО-ГЕЛЕВАЯ
(эксклюзионная)

ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
- ВЭЖХ
ХРОМАТОГРАФИЯ ВЫСОКОГО ДАВЛЕНИЯ
Впервые реализовали в 1970 г
Шаба Хорват и С.Р. Лински
Эффективность разделения достигается применением колонок с мелкодисперсными частицами носителя неподвижной фазы

Схема жидкостного хроматографа

Распределительная ВЭЖХ
Н.ф. – жидкость, п.ф.- жидкость
Метод основан на распределении вещества между двумя несмешивающимися жидкостями.
Разделение происходит из- за различий в растворимости разделяемых веществ в неподвижной и подвижной жидких фазах.

Неподвижные жидкие фазы
Иммобилизованные неподвижные жидкие фазы
н.ж.ф. закреплена на поверхности носителя за счет сил физической адсорбции.
Химически закрепленные неподвижные жидкие фазы
н.ж.ф. закреплена на поверхности носителя
химической связью.
Носители – сферические пористые частицы на основе сверхчистого оксида кремния диаметром 3 – 10 мкм. Диаметр пор – 60 – 300 А˚.

Носители неподвижной фазы

Неподвижные жидкие фазы
На поверхности SiO2 находятся силанольные группы, которые используют для химической модификации поверхности неподвижной фазы.

Неподвижные жидкие фазы
Полярность п.ф. и н.ф. всегда различается.
Нормально-фазовая хроматография
п.ф. – малополярная жидкость
н.ф. – полярная жидкость
Обращенно – фазовая хроматография
п.ф. –полярная жидкость
н.ф. – малополярная жидкость

Обращенные фазы

Нормальные фазы

Подвижные фазы
В нормально-фазовой хроматографии п.ф. – диэтиловый эфир, хлористый метилен, хлороформ, регулируют полярность добавками гексана (модификатор).
В обращенно-фазовой хроматографии п.ф. – метанол, ацетонитрил, тетрагидрофуран, регулируют полярность добавками воды.

КОЛОНКИ
Прямые трубки правильной формы из нержавеющей стали.
Для решения различных аналитических задач выпускают колонки различного диаметра и длины. Чаще с внутренним диаметром d = 3.9 и 4.6мм.
Колонка d = 4.6 мм, заполненная частицами диаметром 5 мкм имеет эффективность от 60000 до 90000 т.т./м при скорости потока 1 мл/мин.
При длине колонки 25 см можно разделить от 50 до 100 пиков.

КОЛОНКИ

Детекторы
УФ-детекторы.
Флуоресцентные детекторы.
Рефрактометрические детекторы.
Электрохимические детекторы(кондуктометрические, кулонометрические, вольтамперометрические).
Масс-спектрометрический детектор.