Медицинская микология. 2 курс презентация

«Fungal evangelists needed - let‘s spread the word»
(Требуются проповедники микологии)
1,5 млрд.человек страдают от грибковых инфекций
Медицинская микология
Bart - Jan Kullberg, Nijmegen, 18-й ISHAM, 2012, Берлин.
B.J. Kullberg

Микозы в мире
D. Denning, 22 EСCMID, Лондон, 2012

Классификация микозов
Поверхностные – микозы кожи и слизистых оболочек
Подкожные или субкутанные (хромомикоз, феогифомикоз)
Инвазивные - глубокие (системные, висцеральные)

10 наиболее значимых
инвазивных микозов
Оппортунистические системные микозы
Bart - Jan Kullberg, Nijmegen, 18-й ISHAM, 2012, Берлин.

Инвазивные микозы
4 основных возбудителя
Candida spp.
Aspergillus spp.
Cryptococcus spp.
Pneumocystis jiroveci
Candida spp.
Aspergillus spp.
Cryptococcus spp.
Pneumocystis jiroveci

Эндемичные микозы
Bart - Jan Kullberg, Nijmegen, 18-й ISHAM, 2012, Берлин.

Медицинская микология – наука о медицински значимых грибах и вызываемых ими заболеваниях – микозах, микоаллергозах и микотоксикозах.

001

Определение понятия «грибы»
Одно- или многоклеточные эукариоты, гетеротрофные, с абсорбтивным (осмотрофным) типом питания, хитиновой клеточной стенкой, сохраняющие энергию в виде гликогена и размножающиеся спорами

Царство Fungi
микромицеты
видны с помощью увеличительных приборов, например, микроскопов
Среди грибов различают:
макромицеты видны невооруженным глазом (ad oculus)

Грибы
≈ 2 млн. видов (прогнозируемое количество)
≈ 75-100 000 видов - XX век
Более 600 тысяч видов - XXI век (Index Fungorum)
≈ 1200 видов грибов ежегодно (XX век)
≈ 30 - 40 000 видов грибов ежегодно (XXI век)
доказанных возбудителей инфекций у человека ≈ 600 видов грибов
www. life-woridwide.org

В лабораторных условиях чистые грибные культуры получают при выделении из исследуемого материала методами механического разобщения и культивирования на искусственных питательных средах.
Грибы растут медленнее бактерий, видимый рост их колоний на твердых питательных средах обычно наблюдается на 3-5 день, а иногда еще позднее – дерматомицеты культивируют до 4-х недель.
Грибы обладают выраженной сахаролитической активностью, поэтому их выращивают на специальных средах, содержащих углеводы:
среда Сабуро;
сусло-агар, мальт-агар;
рисовый, овсяный, картофельный, картофельно-морковный и др.
рН питательной среды для грибов может составлять от слабокислой до нейтральной реакции среды

Сравнение размеров возбудителей

Царство грибы Эукариоты
Отделы:
Ascomycota
Basidiomycota
Mucoromycotina (подотдел)
Mitosporic Fungi (митоспоровые)
(Fungi Imperfecti, несовершенные грибы)

Морфология
Дрожжи (одноклеточные)
Нитчатые (гифальные, филаментирующие, мицелиальные)
Диморфные
дрожжевые
мицелиальные

Морфология грибов
Тело гриба– таллом состоит из тонких нитей – гиф.
Совокупность гиф называется мицелием или грибницей.
Гифы могут иметь перегородки, образуя отдельные клетки. Но в некоторых случаях перегородки отсутствуют (у мукоровых). Поэтому клетки грибов могут содержать одно или множество ядер.

Способы размножения грибов
Вегетативное
Частями мицелия
Артроспорами
Хламидоспорами
Почкованием
Бесполое
Спорангиоспорами
Конидиями
Половое размножение

Дрожжевые грибы
Строение дрожжевой клетки

Гифы
Цилиндрические, септированные филаменты. Большинство грибных гиф имеет диаметр 2-10 мкм

Мицелиальные (нитчатые) грибы

Царство Fungi
Отделы:
п/о Mucoromycotina - ценоцитные гифы
Ascomycota - септированные гифы
простые септы, тельца Воронина
Basidiomycota – септированные гифы
долипоровые сеты, парентосомы

Candida spp.
Candida spp.- 743 вида грибов (Index Fungorum)
Доказанных возбудителей кандидоза – 40 видов
Основные возбудители:
C.albicans
C. parapsilosis
C. tropicalis
C. glabrata
C.krusei
C.kefyr
и другие
Clinical Microbiology and Infection 2013.
Н.П. Елинов и др. Candida. Кандидозы. Лабораторная диагностика, 2010

Культура Candidа spp.
Микроскопия Candidа spp.: концевые (терминальные) хламидоспоры.

ростовая трубка
Candida albicans
Candida dubliniensis
Candida africana
Почкование
дрожжевой клетки

Хромогенный агар для Candida
Диагностика 5-ти клиническизначимых видов Candida
(название и цвет колоний) :
1) C. albicans - зелёные
2) C. tropicalis – тёмно-голубые
3) C. krusei – розово-коричневые
4) C. glabrata - бежевые/жёлтые
5) C. parapsilosis - коричневые
Молочно-белый фон позволяет удобно и чётко дифференцировать виды Candida
Результат – в течение 24 - 48 ч.

р. Rhodotorula

Malassezia spp.
Дрожжи Malassezia spp. – это представители нормальной биоты кожи человека, а также возбудители кожных и системных инфекций у больных с тяжелыми иммунодефицитами.
Возрастает частота тяжелых системных инфекций, вызванных грибами р. Malassezia у больных с иммунодефицитами.

Дрожжевые клетки и короткие
гифальные элементы - кожные чешуйки, КОН, ув. Х400 световая микроскопия
Типичная тканевая форма при отрубевидном лишае
Malassezia spp.

Cryptococcus neoformans
Тушевой препарат
Колонии на среде Сабуро

Аски Saccharomyces cerevisiae

Мукоромицеты

Rhizopus spp.

Rhizopus spp. в культуре (микроскопия)

Rhizomucor spp.
Коларетта (воротничок)

Mucor spp. в культуре (микроскопия))
Гифы (мицелиальные нити) – ветвятся под прямым углым

Lichtheimia spp.

Aspergillus spp.
Микроскопия: Типичные головки и цепочки конидий.

Морфологические структуры p. Aspergillus
Микроскопия: Типичные головки и цепочки конидий.

Клетки Хюле (Hϋle cells)

Культуральные и морфологические признаки A. fumigatus

Видовая идентификация Aspergillus spp.
Aspergillus fumigatus
Aspergillus fumigatus
Aspergillus lentulus
Aspergillus fumigatiaffinis
Aspergillus novofumigatus
Aspergillus viridinutans
Aspergillus fumisynnematus
Молекулярно-биологическая
Традиционная

Культуральные и морфологические признаки A. niger

Aspergillus niger
1. Описание макрокультуры:
На среде Сусло-агар: колония темно-коричневого цвета, бархатистая, спороносная зона черного цвета, мицелий воздушный, субстратный; обратная сторона слегка складчатая, белого цвета.
На среде Чапека: колония черного цвета, бархатистая, хорошее спороношение, появляется на 4 сутки; обратная сторона гладкая, белого цвета.
2. Описание микрокультуры:
При микроскопии: конидиеносцы гладкие, бесцветные, или слегка шероховатые, шириной 20 мкм. Вздутия сферические, диаметром 50-55 мкм бурого цвета. Фиалиды на метулах располагаются радиально, по всей поверхности вздутия, цилиндрические, темно-бурого цвета:
метулы размером 12х4 мкм
фиалиды размером 5х3 мкм
Конидии круглые, шероховатые, от светло-коричневых до темно-бурых, диаметром – 3,9 мкм. Скопления конидий черного цвета.
Мицелий септированный, бесцветный, шириной 4 – 4,3 мкм.
Растет при t°+28° и t°+37°.

Культуральные и морфологические признаки A. flavus

Культуральные и морфологические признаки A. terreus

A. nidulans

Морфологические структуры р. Penicillium

Penicillium sp.

Acremonium spp.
Растут на среде с циклогексимидом и без него. На среде без циклогексимида образуют бело-розовые бархатистые колонии в течение одной недели.
Микроскопия: Эллиптические конидии, собранные в группы у верхушек длинных фиалид.
Acremonium spp.

Acremonium spp.

Scopulariopsis brevicaulis
Растет на среде с циклогексимидом и без него. Образует в течение одной недели коричневые колонии с мучнистой поверхностью и светло-коричневой обратной стороной.
Микроскопия: Многочисленные разветвленные конидиеносцы с цепочками конидий, имеющих лимоновидную форму.
Scopulariopsis brevicaulis

Культура Scopulariopsis.
Культура Scopulariopsis
Микроскопия культуры Scopulariopsis

Trichoderma sp.
Trichoderma viride

Fusarium spp.
Растут только на среде без циклогексимида. В течение недели образуют плоские колонии, которые окрашены в бледно-розовый или коричневатый цвет.
Микроскопия: Многочисленные серповидные макроконидии и эллиптические или овальные микроконидии.

Fusarium sp.
Fusarium (culmorum)
Fusarium (gibbosum)

ОПАКО(ФЕО)ГИФОМИЦЕТЫ
Феоидные (демациевые) грибы – это грибы, окрашенные в цвета от бурого до черного за счет содержания в клеточных стенках меланина. У многих феоидных (демациевых) грибов в начале роста окраска бледная, а по мере созревания все более темная.

Феогифомицеты, как тёмно-окрашенные грибы могли бы быть названы опакомицетами или фускомицетами (по-лат. opacus и fuscus - тёмный).
Alternaria spp.
Aureobasidium pullulans
Bipolaris sp.
Exerohilum sp.
Cladophialophora spp.
Cladosporium spp.
Curvularia sp.
Drechslera sp.
Exophiala spp.
Fonsecaea sp.
Hormonema dematioides
Phialophora spp.
Phoma sp.
Xylohypha sp.
Представители

p. Alternaria
Alternaria alternata
Признаки рода:
темные распростертые колонии
мицелий и конидии пигментированы
конидии многоклеточные с продольными и поперечными перегородками, преимущественно в цепочках
Окраска обратной стороны колонии Alternaria sp.

Alternaria sp.
Микроскопия культуры Alternaria sp.: конидии с поперечными и продольными перегородками.

р. Alternaria
В культуре – акропетальное образование муральных конидий в цепочках.
Муральная спора – это спора (аскоспора или конидия), имеющая вертикальные и горизонтальные септы

Представители рода распространены широко – в почве, на деревьях, на стенах в сырых помещениях
р. Alternaria
Колонизация Alternaria sp. кожицы томата с типичной темной пигментацией

р. Alternaria
Колонии быстрорастущие серые до оливковых, мучнистые до шерстистых.
Конидиеносцы прямые коричневые многоклеточные.
Конидии коричневые, гладкостенные или бородавчатые с закругленным основанием и сужающейся верхушкой, перегородки продольные и поперечные.
Аскомицет. Порядок Pleosporales.
Род представляет собой большое число видов. Преимущественно - сапротрофных или патогенных. Большинство клинических случаев – поражение кожи после травм. Онихомикозы. Синуситы. Микотический кератит.

Alternaria sp. выделен из соскоба с роговицы глаза на агаре Сабуро
р. Alternaria

р. Alternaria

Дерматомицеты
Грибы родов:
Trichophyton
Microsporum
Epidermophyton