Содержание
- 2. методы выделения ферментов
- 3. на чем основаны осаждение и высаливание Ферменты — белки Основной растворитель — вода Можно повлиять на
- 4. ОСАЖДЕНИЕ ОРГАНИЧЕКИМИ РАСТВОРИТЕЛЯМИ Растворитель должен смешиваться с водой Растворитель не должен связываться с ферментом Следует помнить
- 5. ОСАЖДЕНИЕ ОРГАНИЧЕКИМИ РАСТВОРИТЕЛЯМИ Молекулы воды, гидрофобных участках поверхности белка, могут быть замещены на молекулы органического растворителя
- 6. Размер молекулы белка Крупные молекулы агрегируют быстрее, чем мелкие факторы, влияющие на осаждение
- 7. Температура Большинство ферментов при комнатной температуре легко денатурируются органическими растворителями На всех этапах работу следует проводить
- 8. рН среды Наиболее полно ферменты выпадают в изоэлектрической точке Изоэлектрическое осаждение — процесс осаждения белков в
- 9. установка для непрерывного осаждения ферментов а – общая схема: 1- сборник для ферментного раствора; 2 –
- 10. ОСАДИТЕЛЬ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ ИЗ РАСТВОРОВ 1 – корпус; 2 – указатель уровня; 3 – крышка; 4
- 11. Примеры осаждения органическими растворителями Гексокиназа — этанолом из дрожжей Ферменты мышечного экстракта — ацетоном Амилаза —
- 12. осаждение ферментов высококонцентрированными растворами солей (высаливание) Молекулы воды связываются с молекулами небелковой природы. Происходит дегидратация неполярных
- 13. какие соли используются По силе высаливающего действия анионы натриевых солей можно расположить в следующий ряд: SO4
- 14. Соль добавляют порциями и при перемешивании Локальные повышения концентрации Перемешива-ние должно быть умеренным Вспенивание раствора, денатурация
- 15. СРАВНЕНИЕ Сравнен + Осадки имеют однородную структуру, их легко сушить, слабо окрашены и хорошо растворяются +Можно
- 16. ПРИМЕР: ВЫДЕЛЕНИЕ ДЕГИДРОГЕНАЗЫ ИЗ ДРОЖЖЕЙ
- 17. Чаще всего используют декстран и полиэтиленгликоль различной степени полимеризации. ОСАЖДЕНИЕ ФЕРМЕНТОВ ОРГАНИЧЕСКИМИ ПОЛИМЕРАМИ
- 18. ОСАЖДЕНИЕ ПОЛИЭТИЛЕНГЛИКОЛЕМ (ПЭГ) Для осаждения используют ПЭГ двух типов: с молекулярными массами 6 000 и 20
- 19. ОСАЖДЕНИЕ ИОНАМИ МЕТАЛЛОВ Для выделения ß-галактозидазы из разрушенных клеток E.coli успешно используются ионы марганца. После удаления
- 20. Приемлем только для стабильных ферментов, сохраняющих устойчивость в экстремальных условиях внешней среды. ИЗБИРАТЕЛЬНАЯ ДЕНАТУРАЦИЯ Пример: глюкозоизомераза
- 21. Осаждение ферментов можно осуществить: 1) органическими растворителями (этанол, изопропанол, ацетон и др.); 2) высаливанием (сульфат аммония,
- 22. Егорова Т.А. Основы биотехнологии: учеб. пособие для высш. пед. учеб. заведений / Т.А. Егорова, С.М. Клунова,
- 24. Скачать презентацию